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離心類型

  1. 差速造粒（差速離心）
  • 這是zui常用的離心方式。
  • 在包含緩沖液的蔗糖溶液中，將組織（例如肝臟）在32度下均質(zhì)化。
  • 然后將勻漿置于離心機(jī)中，并在恒定溫度下以恒定離心力旋轉(zhuǎn)。
  • 一段時(shí)間后，在離心機(jī)底部形成沉淀物，稱為沉淀，上方的溶液稱為上清液。
  • 然后將上層溶液置于另一個(gè)離心管中，然后在進(jìn)行的步驟中以更高的速度旋轉(zhuǎn)。
  1. 密度梯度離心
  • 這種離心主要用于純化病毒，核糖體，膜等。
  • 通過將較低濃度的蔗糖輕輕覆蓋在離心管中的較高濃度上來創(chuàng)建蔗糖密度梯度
  • 將感興趣的顆粒置于超速離心機(jī)的梯度和離心機(jī)頂部。
  • 顆粒穿過梯度，直到達(dá)到其密度與周圍蔗糖的密度相匹配的點(diǎn)。
  • 除去級(jí)分并分析。
  1. 速率-區(qū)域密度-梯度離心
  • 帶狀離心也稱為帶式或梯度離心
  • 它依賴于沉降系數(shù)的概念（即，沉積物在液體介質(zhì)中的運(yùn)動(dòng)）
  • 在這種技術(shù)中，在底部具有蔗糖且高密度的試管中創(chuàng)建了密度梯度。
  • 將蛋白質(zhì)樣品放在梯度的頂部，然后離心。
  • 通過離心，樣品中沉降速度更快的顆粒將移至較慢的顆粒之前，即樣品以梯度區(qū)域分開。
  • 蛋白質(zhì)沉淀物根據(jù)其沉淀系數(shù)和餾分通過在試管底部創(chuàng)建一個(gè)孔來收集。
  1. 等速離心
  • 將樣品與梯度形成溶液一起裝入試管中（在預(yù)先形成的梯度之上或之下，或與自形成梯度混合）
  • 生物樣品和銫鹽的溶液均勻地分布在離心管中，并在超速離心機(jī)中旋轉(zhuǎn)。
  • 在離心力的影響下，銫鹽從頂部到底部重新分布以形成密度梯度。
  • 粒子移動(dòng)到其浮力密度等于梯度的那部分并形成帶的位置。也就是說，樣本分子移動(dòng)到其密度等于梯度密度的區(qū)域。
  • 這是一個(gè)“真正的”均衡程序，因?yàn)樗Q于彈性密度而不是速度
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